Swoistość odczyny Nelsona
Według zgodnych poglądów współczesnego piśmiennictwa odczyn Nelsona odznacza się bezwzględną swoistością. Immobilizyny występują jedynie w surowicy ludzi i zwierząt doświadczalnych zakażonych krętkiem bladym, a także krętkami patogennymi powodującymi krętkowice i kiłę endemiczną. Przekonanie o swoistości odczynu Nelsona, oparte początkowo na przesłankach teoretycznych, zostało udowodnione licznymi badaniami doświadczalnymi i...
Metodyka ilościowa odczynu Nelsona
W celu wykonania odczynu metodą ilościową rozcieńcza się badaną surowicę roztworem fizjologicznym NaCl. Zwykle badanie ilościowe zaczyna się od rozcieńczenia surowicy w stosunku 1/20 albo 1/20. Następne rozcieńczenia rosną w postępie geometrycznym (1/20, 1/40, 1/80, 1/160, 1/320 itd.). Jeżeli w 3 kolejnych rozcieńczeniach stwierdza się odsetek unieruchomienia niższy niż 50%, odczytywanie dalszych rozcieńczeń przerywa się. Za miano...
Probówka główna
Probówka główna zawiera 0,25 ml zawiesiny krętków, utrzymywanych przy życiu na sztucznym podłożu, 0,2 czynnego dopełniacza i 0,05 badanej surowicy. Probówka 2 jest kontrolą surowicy, którą dodaje się do każdej probówki głównej. Zadaniem kontroli jest ewentualne wykazanie toksycznych właściwości surowicy, powodujących nieswoiste unieruchomienie krętków. Zawiera ona te same składniki, co probówka główna, z tą jednak różnicą, że zamiast...
Sposób nastawiania odczynu
Probówki zawierające zawiesinę krętków w pożywce podstawowej, dopełniacz i badaną surowicę umieszcza się w anaerostatach, z których za pomocą pompy próżniowej usuwa się powietrze. Anaerostaty przepłukuje się 5-krotnie mieszanką gazową, zawierającą 95% azotu i 5% CO2. Następnie anaerostat napełnia się mieszanką o tym samym składzie. Mieszanka ta musi być wolna od zanieczyszczeń tlenowych, gdyż domieszka tlenu przekraczająca 0,02%...
Surowica badana
Surowica badana musi być pobrana i przechowywana w sposób zmniejszający możliwość jej nieswoistego, toksycznego działania na krętki. Do użycia w odczynie Nelsona nie nadają się surowice przerośnięte drobnoustrojami, zhemolizowane lub zawierające nieznaczną nawet ilość leków lub środków antyseptycznych działających przeciwkrętkowo. Krew do badania na odczyn Nelsona powinna być pobrana jałowo. Skórę należy odkażać eterem. Do pobierania...
Dopełniacz odczynu Nelsona
W odczynie Nelsona oddziaływanie między antygenem a immobilizynami zachodzi jedynie w obecności czynnego dopełniacza. Jako dopełniacza używa się świeżej surowicy świnki morskiej. Przeprowadzone w Pracowni Białostockiej próby zastosowania dopełniacza liofilizowanego wykazały, że nie nadaje się on do użycia ze względu na działanie toksyczne na krętki. Ponieważ również świeża surowica niektórych świnek morskich wykazuje cechy toksyczne,...
Najnowsze komentarze