Odczytywanie i interpretacja wyników odczynu immunofluorescencji
Urządzenia optyczne. Wyniki odczynu odczytuje się w ciemnym polu widzenia mikroskopu fluorescencyjnego. W Pracowni Białostockiej używa się mikroskopu fluorescencyjnego Binolux II firmy Reichert, wyposażonego w lampę rtęciową HBO 200. Jako filtru pobudzającego używa się filtru BG 12 (6 mm), a jako filtru hamującego — zestawu dwóch filtrów, a mianowicie GG 9 (1 mm) i OG 1 (1,5 mm). Powtarzalność odczynu zależy w znacznej mierze od...
Sposób wykonania odczynu immunofluorescencji
Przygotowanie antygenu. Do odczynu używa się szkiełek grubości 1 mm. Na oznaczonych diamentem polach umieszcza się pipetą pasteurowską cienką warstwę zawiesiny antygenowej. Preparat utrwala się przez 5 min. w temperaturze pokojowej. Deacon i niektórzy inni autorzy stosują metodę utrwalania antygenu acetonem lub wysoką temperaturą. Zgodnie z doświadczeniem Pracowni Białostockiej utrwalanie preparatu acetonem powoduje nieznaczne...
Surowica badana w odczynie immunofluorescencji
Surowica badana powinna być przejrzysta, ale nie musi być bezwzględnie jałowa. Cechy toksyczne surowicy upośledzające przeżywalność krętków na sztucznym podłożu nie wpływają na wynik OIFK. W odczynie jakościowym stosuje się w Pracowni Białostockiej wstępne rozcieńczenie surowicy w stosunku 2/50. Do rozcieńczeń używa się buforowanego roztworu soli o pH 7,2, którego skład został opisany przez Wilkinsona. Większość pracowni posługuje się...
Znakowana surowica odpornościowa
Znakowana surowica odpornościowa jest uzyskiwana przez uodpornienie królika roztworem yalobulin ludzkich. Niektóre pracownie posługują się surowicą antyglobulinową uzyskaną przez uodpornienie kozy. W Pracowni Białostockiej króliki uodparnia się roztworem y-globulin produkcji Lubelskiej Wytwórni Surowic i Szczepionek. Uodpornienie przeprowadza się według metody opisanej przez Prooma. Globuliny surowicy odpornościowej wytrąca się...
Medotyka odczynu immunofluorescencji
Opis metodyki OIFK podany zostanie na podstawie doświadczenia własnego Pracowni Białostockiej, która odczyn ten wykonuje od 8 lat. Sposób wykonywania odczynu w Pracowni Białostockiej różni się niektórymi szczegółami technicznymi od metodyki Deacona, a także od techniki FTA zmodyfikowanej przez Fribourg-Blanca i Niela. W niniejszym rozdziale omówione będą również te doniesienia piśmiennictwa, które mają istotne znaczenie dla dalszego...
Najnowsze komentarze